flumist 四价疫苗：特点、制造工艺及使用方法

       药物概述

       flumist 四价（流感疫苗活疫苗，鼻内）是一种通过鼻内喷雾给药的四价活疫苗。它是针对四种不同流感病毒株的疫苗，包括 a/h1n1、a/h3n2 和两种 b 株。flumist 四价包含来自 b/yamagata/16/88 和 b/victoria/2/87 谱系的 b 菌株。这种疫苗是使用与 flumist 相同的工艺制造的。

       病毒特点

       flumist 四价中的流感病毒株是：（a）冷适应的（ca），即它们在 25°c 下有效复制，该温度限制了许多野生型流感病毒的复制；（b）温度敏感（ts），即它们在 37℃ (b型毒株) 或 39℃ (a型毒株) 下复制受到限制，而许多野生型流感病毒在此温度下有效生长；和 (c) 减毒 (att)，即它们在人类流感感染的雪貂模型中不会产生典型的流感样疾病。

       病毒株的特性

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       在使用 flumist 测试的回收疫苗株（可能的 250 个回收分离株中的 135 个）中未观察到逆转的证据。

       对于 flumist 四价中的四个重配株中的每一个，负责 ca、ts 和 att 表型的六个内部基因片段均来自主供体病毒（mdv），而编码两种表面糖蛋白血凝素的两个片段（ha）和神经氨酸酶（na）来自相应的抗原相关的野生型流感病毒。因此，flumist 四价中包含的四种病毒保持了 mdv 的复制特性和表型特性，并表达了野生型病毒的 ha 和 na。对于 a型 mdv，至少有五个基因是。三个不同内部基因片段中的 hatic 基因座有助于 ts 和 att 表型。对于 b型 mdv，两个不同内部基因片段中的至少三个遗传基因座有助于 ts 和 att 特性；三个基因片段中的五个遗传基因座控制 ca 属性。

       flumist 四价中的每个重配毒株都表达与预计在 2016-2017 流感季节传播的毒株相关的野生型病毒的 ha 和 na。

       美国公共卫生局（usphs）建议将三种病毒（a/h1n1、a/h3n2 和一种 b 株）纳入年度三价和四价流感疫苗制剂中。usphs 建议将另一种 b 株纳入四价流感疫苗制剂中。

       制造工艺

       用每种重配菌株接种无特定病原体（spf）卵，并孵育以允许疫苗病毒复制。收集这些卵的尿囊液，合并，然后通过过滤澄清。通过超速离心浓缩病毒，并用稳定缓冲液稀释，以获得最终的蔗糖和磷酸钾浓度。然后将病毒收获物无菌过滤以产生单价散装。每个批次都进行了 ca、ts 和 att 表型测试，并且还通过体外和体内方法进行了广泛的测试，以检测外来物质。随后将来自四种菌株的单价原液混合并根据需要稀释，以达到稳定缓冲液的所需效力，从而生产四价原液疫苗。然后将散装疫苗直接填充到单个喷雾器中进行鼻腔给药。每个预填充冷冻 flumist 四价喷雾器包含一个 0. 2 ml 剂量。每个 0. 2 ml 年龄的剂量包含 106. 5-7. 5 ffu（荧光聚焦单位）的四种毒株中的每一种的活减毒流感病毒重配株：a/bolivia/559/2013（h1n1）（a/california/7/2009（h1n1）pdm09样病毒），a/new caledonia/71/2014（h3n2）（a/hong kong/4801/2014（）。每 0. 2 ml 剂量还含有 0. 188 mg/剂量味精，2. 00 mg/剂量水解猪明胶，2. 42 mg/剂量精氨酸，13. 68 mg/剂量蔗糖，2. 26 mg/剂量磷酸氢二钾和 0. 96 mg/剂量磷酸二氢钾。

       每个剂量含有残留量的卵清蛋白（<0. 24 mcg/剂量），还可能含有残留量的硫酸庆大霉素（<0. 015 mcg/ml）和乙二胺四乙酸（edta）（<0. 37